Воздействие на мейоз ультрафиолетовым излучением
Ограниченный набор доноров диплоидных гамет с ценными признаками и, в том числе, с генами иммунитета к парше, является существенным сдерживающим фактором для успешного выполнения селекционной программы на полиплоидном уровне. Цель воздействия – выявление возможности получения нередуцированных микроспор. При успешном результате опытов появляется возможность при осуществлении гетероплоидных скрещиваний включить в генотип гибрида двойную дозу нужного гена, в частности, гена иммунитета к парше. Имея на вооружении подобные методы, селекционер, в определенной мере, может прогнозировать свойства будущих сортов.
Учитывая, что максимальное мутагенное действие на клетку оказывают лучи с длиной волны 2000-3200 А при максимуме 2500-2600 А, нами в качестве источников излучения применялись лампы БУВ-30, дающие практически монохроматическое излучение с длиной волны 2537 А
В качестве объекта служили два диплоидных сорта яблони Свежесть и Орлик. Ветки срезали с 2-3-летней древесиной и максимально большим количеством цветковых почек и помещали в сосуды с водой. Облучение ветвей начинали с наступлением мейоза (в пыльниках спорогенная ткань на стадии профазы). Продолжительность обработки 3 часа (с 9-00 до 12-00) на протяжении трех последующих дней. Контролем служили ветви этих же сортов, распускающиеся в условиях лаборатории.
Тщательный анализ последовательных стадий мейоза при микроспорогенезе свидетельствует о том, что в опытных вариантах количество и разнообразие нарушений значительно больше, чем в контроле (таблица 4, рис. 1, 2), хотя общая направленность кривой, отображающей ход мейоза сохраняется. Значительно возрастает количество нарушений при обработке цветковых почек Уф-излучением на завершающих стадиях мейоза. Здесь отмечено значительное количество спорад с аномальным, по сравнению с контролем, числом микроспор. Наибольший интерес с точки зрения задачи, поставленной в опыте, представляют факты образования диад или триад макроспор. Это происходит в результате нарушений функции ахроматинового веретена на стадии анафаза-II. Реакция разных сортов на обработку Уф-излучением не однозначна: у сорта Свежесть образуется в 1,5 раза больше нередуцированных микроспор, чем в контроле, а у сорта Орлик - в 4,8 раза. Такие различия, по всей вероятности, являются следствием сортовых особенностей. Кроме того, при обработке генеративных почек Уф-излучением у отдельных сортов может повышаться жизнеспособность пыльцы. Так у сорта Орлик процент проросшей пыльцы после обработки – 33, 3%, а в контроле только 16,0%.
4. Результат воздействия на мейоз при микроспорогенезе Уф-излучения
Стадия мейоза | Сорт Свежесть | Сорт Орлик | |||
контроль | УФЛ | контроль | УФЛ | ||
% нарушений | Метафаза-I | 6,1 | 17,9 | 4,2 | 9,1 |
Анафаза-I | 4,0 | 26,7 | 1,3 | 4,6 | |
Телофаза-I | 0,5 | 2,7 | 0,5 | 0 | |
Метафаза-II | 16,4 | 14,0 | 10,7 | 12,3 | |
Анафаза-II | 4,6 | 8,3 | 3,1 | 3,4 | |
Телофаза-II | 0 | 10,4 | 4,1 | 11,4 | |
Тетрады | 3,7 | 6,6 | 0,6 | 5,9 | |
Микроспоры | 5,0 | 18,4 | 9,2 | 10,4 | |
% нередуцированных гамет | 5,0 | 7,5 | 0,9 | 4,3 | |
% прорастания пыльцы | 35,2 | 23,3 | 16,0 | 33,3 |
Характер нарушений в мейозе при воздействии на генеративные почки УФЛ
Таким образом, обработка генеративных почек ультрафиолетовым излучением во время прохождения мейоза стимулирует формирование нередуцированных гамет в 4,3-7,5% случаев, а также может повышать жизнеспособность пыльцы.