Формирование гамет у отдаленного гибрида вишни №85017
УДК 576.354. 4:575. 127.2:634.23 2007
Авторы: Горбачева Н.Г.
Важная задача селекции сельскохозяйственных культур - создание сортов, устойчивых к неблагоприятным факторам среды, невосприимчивых к болезням и вредителям. В полной мере это относится и к культуре вишни, которая является одной из распространенных и популярных косточковых пород (Жуков, Харитонова, 1988).
Оптимальный уровень плоидности у вишни – тетраплоидный (2n=32). Это почти всегда нормально плодовитые растения (Ерёмин, 1985).
В работе по отдаленной гибридизации важно удачное привлечение в селекцию доноров ценных признаков. Примером может служить отдаленный межвидовой гибрид вишни №85017 Cerasus vulgarus Mill. x Padellus Maximoviсzii Erem. еt Jushev, полученный в лаборатории селекции косточковых культур ВННИИСПК Е.Н. Джигадло. Этот гибрид был выделен как донор устойчивости к коккомикозу и монилиозу.
Дерево гибрида №85017 (в. Любская ´ в. Максимовича) среднерослое. Средняя степень цветения- 3 балла. Плоды мелкие- 2,3 балла, почти черные. Вкус кисло-сладкий, 3,9 балла. Подмерзание за годы исследований не отмечено. Максимальный балл повреждения коккомикозом – 1, монилиозом – 1. Не отмечено повреждений тлёй.
Так как этот гибрид является донором ценных признаков, изучение хода микроспорогенеза и определение качества формируемых им гамет позволит установить возможность использования его в селекции для получения сортов вишни, устойчивых к монилиозу и коккомикозу, с высокой зимостойкостью.
Работа выполнена в лаборатории цитоэмбриологии ВНИИСПК. Объектом для изучения послужила тетраплоидная форма вишни №85017.
Для изучения хода мейоза цветковые почки фиксировали в уксусном алкоголе (3:1). Фиксацию проводили в условиях лаборатории со срезанных ветвей, поставленных в вегетационные сосуды с водой. Фиксация темпоральная, на протяжении нескольких дней с момента появления зеленого конуса и до распускания цветка. Из фиксированного материала готовили временные давленные препараты ацетогематоксилиновым методом (Топильская, Лучникова, Чувашина, 1975). Препараты изучали на микроскопе Biolar, при увеличении 10 х 1,5 х 40, 10 х 1,5 х 100.
Результаты исследований
Анализируя состояние генеративной сферы у отдаленного тетраплоидного гибрида №85017, можно отметить, что ход мейоза у него сопровождается некоторыми нарушениями на всех последовательных стадиях (таблица 1). Число этих нарушений варьирует от 15,3 % на стадии телофаза-II до 52,2 % на стадии анафаза- I.
1. Характеристика мейоза при микроспорогенезе у тетраплоидного гибрида вишни № 85017
Стадии мейоза | Всего изучено клеток | В том числе | + m | |||
нормальных | с нарушениями | |||||
шт. | % | шт. | % | |||
метафаза-I | 261 | 158 | 60,5 | 103 | 39,5 | 9,2 |
анафаза-I | 157 | 75 | 47,8 | 82 | 52,2 | 15,9 |
телофаза-I | 334 | 269 | 80,5 | 65 | 19,5 | 4,7 |
метафаза-II | 279 | 181 | 64,9 | 98 | 35,1 | 8,2 |
анафаза-II | 198 | 139 | 70,2 | 59 | 29,8 | 10,6 |
телофаза-II | 425 | 360 | 84,7 | 65 | 15,3 | 3 |
тетрады | 860 | 715 | 83,1 | 145 | 16,9 | 1,6 |
пыльца | 3063 | 2790 | 91,1 | 273 | 8,9 | 0,3 |
Спектр нарушений довольно широк (таблица 2). Следует отметить, что количество нарушений, как при первом - гетеротипическом делении мейоза, так и при втором - гомеотипическом приблизительно одинаковое. Число типов нарушений на каждой стадии составляет от 1 до 3, только во время анафазы-II число типов нарушений - 4. На стадии метафаза-I наиболее распространенным типом нарушений является забегание от одной до четырех хромосом к одному или обоим полюсам веретена деления (88,3% от общего числа нарушений).
Анафаза-I первого мейотического деления характеризуется отставанием 1-6 хромосом в процессе анафазного движения в центре ахроматинового веретена (100%). На стадии телофазы-I наблюдаются сверхчисленные ядра или микроядра. Их количество составляет от 1 до 5. Такие микроспороциты составляют 100% от общего числа нарушений.
Метафаза II – второго мейотического деления характеризуется забеганием и выбросами хромосом. В общей сложности они составляют – 96,9%. Также встречается комбинация из 2х типов нарушений (3,1%) в одном микроспороците.
2. Типы нарушений на последовательных стадиях мейоза у тетраплоидного гибрида вишни № 85017
Стадии мейоза | Общее число нарушений | Типы нарушений | Кол-во клеток | % от общего числа нарушений |
метафаза-I | 103 | забегание 1-4 хромосом | 91 | 88,3 |
2-ярусное распределение хромосом | 11 | 10,7 | ||
2 группы хромосом | 1 | 1,0 | ||
анафаза-I | 82 | отставание 1-6 хромосом | 82 | 100 |
телофаза-I | 65 | микроядра (1-5) | 65 | 100 |
метафаза-II | 98 | забегания | 85 | 86,7 |
выбросы (1-2) | 10 | 10,2 | ||
комбинация из 2х типов | 3 | 3,1 | ||
анафаза -II | 59 | отставание 1-3 хромосом | 55 | 93,2 |
комбинация из 2х типов | 1 | 1,7 | ||
3 веретена | 2 | 3,4 | ||
4 веретена | 1 | 1,7 | ||
телофаза-II | 65 | микроядра (1-5) | 65 | 100 |
тетрады | 145 | монада | 1 | 0,7 |
диада | 2 | 1,4 | ||
триада | 13 | 9,0 | ||
сверхчисленные микроспоры от 1 до 8 | 127 | 87,6 | ||
микроспороцит в 1,5 р. крупнее обычного, микроспоры разной величины и ядра в них так же разные | 1 | 0,7 | ||
микроспороцит в 1,5р. крупнее обычного, микроспоры одинаковой величины | 1 | 0,7 |
В анафазе II преобладающим типом нарушений является отставание хромосом в центре ахроматинового веретена. Этот тип нарушений составляет 93,2% от общего числа. Также здесь можно отметить микроспороциты с 3-4 фигурами деления в одном микроспороците. Сверхчисленные веретена являются следствием выброса групп хромосом в цитоплазму микроспороцита на предыдущих стадиях деления.
На стадии телофаза-II единственным типом нарушений является наличие сверчисленных ядер и микроядер (100%). В последствии это приводит к формированию полиад вместо нормальных тетрад. Число микроспор в спораде может колебаться от 5 (пентада) до 8 (октада). Отмечены случаи образования небольшого количества монад, диад, триад. Такие микроспороциты составляют в общем 11,1%. Кроме перечисленных типов нарушений встретились 2 микроспороцита в 1,5 раза крупнее обычного. В одном из них находились микроспоры разной величины и ядра в них также разные. Во втором микроспоры крупные, одинаковые по размеру .
На стадии пыльцы крупные пыльцевые зерна составляют 6%, мелкие – 2,9%. Одномерная, среднего размера пыльца составляет – 91,1% (таблица 3).
3 Характеристика пыльцы у отдаленного гибрида вишни № 85017
Пыльца | Всего изучено клеток | Крупная пыльца | Мелкая пыльца | Одномерная пыльца | |||
шт. | % | шт. | % | шт. | % | ||
3063 | 184 | 6 | 89 | 2,9 | 2790 | 91,1 |
Исходя из данных таблицы 3, несмотря на некоторые количество нарушений в ходе мейоза, у данной формы образуется более 90% предположительно нормальной пыльцы. Более точно характеризовать пыльцу у формы 85017 можно после изучения ее жизнеспособности. Тем не менее, полученные данные позволяют сделать вывод, что гибрид 85017 вполне может быть использован при гибридизации в качестве отцовского родителя.